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林麝源化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌三重实时荧光定量PCR检测方法的建立

林麝源化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌三重实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者:唐婕 刘二龙 周建文 杨超 索丽娟 边坤 蒋本模 王艳 TANG Jie;LIU Er-long;ZHOU Jian-wen;YANG Chao;SUO Li-juan;BIAN Kun;JIANG Ben-mo;WANG Yan

作者机构:陕西省动物研究所陕西西安710032 黄埔出入境检验检疫技术中心广东广州510730 凤县林业局留凤关林场陕西凤县721707 宝鸡市林麝工程技术研究中心陕西宝鸡721702 凤县逢春济民可信科技养殖有限公司陕西凤县721702 

基  金:陕西省科技厅重点项目(2018ZDXM-NY-071) 陕西省科学院一所一品项目(2018K-01) 

出 版 物:《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期:2020年第41卷第12期

页      码:23-27页

摘      要:为快速准确检测化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌,分别根据化脓隐秘杆菌plo基因、溶血性曼氏杆菌ICEMh1基因和肺炎链球菌pspC基因的特异性序列设计引物和探针,以重组质粒a.p-m.h1-s.p为标准品,通过优化反应条件,建立一种检测化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌三重实时荧光定量PCR方法,对其特异性、灵敏度和可重复性进行测试。结果表明,建立的方法对标准品阳性质粒的最低检测量为20拷贝,标准曲线在1.25×10^6 copies/μL^1.0×101 copies/μL范围内具有良好的线性关系。对2016年-2018年在陕西省收集的病料中化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌检出率分别为66.67%、5.5%和44.44%。建立的三重实时荧光定量PCR方法能快速、准确和稳定地检测化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌。

主 题 词:林麝 化脓隐秘杆菌 溶血性曼氏杆菌 肺炎链球菌 三重实时荧光定量PCR 

学科分类:090601[090601] 0907[农学-草药学] 090705[090705] 09[农学] 0906[农学-水产类] 0903[农学-动物生产类] 

D O I:10.16437/j.cnki.1007-5038.2020.12.005

馆 藏 号:203100046...

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