重组猪胰蛋白酶原及其突变体在毕赤酵母X33中的组成型表达

作     者：窦俊 方宏清 徐登圆 赵珊珊 陈慧梅 徐晓峰 支艳艳 李晓稳 文良柱 DOU Jun;FANG Hong-Qing;XU Deng-Yuan;ZHAO Shan-Shan;CHEN Hui-Mei;XU Xiao-Feng;ZHI Yan-Yan;LI Xiao-Wen;WEN Liang-Zhu

作者机构：中国药科大学江苏南京211198 江苏万邦医药科技有限公司江苏徐州221004 江苏万新医药科技(苏州)有限公司江苏苏州215000 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2020年第31卷第5期

页      码：511-516,560页

摘      要：目的:设计以PGAP为启动子的组成型质粒,构建高效表达重组猪胰蛋白酶原的毕赤酵母X33菌株,获得重组猪胰蛋白酶。方法:首先将质粒转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,电转化至毕赤酵母X33,表达重组猪胰蛋白酶原,经肠激酶激活,纯化提取得到重组猪胰蛋白酶。结果:筛选到高效表达重组猪胰蛋白酶原的毕赤酵母X33菌株,获得了重组猪胰蛋白酶。结论:以PGAP为启动子的质粒,转化毕赤酵母X33后表达的重组猪胰蛋白酶原避免了补加甲醇带来的危害,且操作方便,大大缩短了周期,提高了生产效率,避免了动物源性污染。

主 题 词：毕赤酵母X33 重组猪胰蛋白酶原 重组猪胰蛋白酶 酵母表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2020.05.002

馆 藏 号：203100075...