人乙醇脱氢酶ADH1B2在毕赤酵母中的表达及活性分析

作     者：汤甜甜 周亮 吉鹏飞 鲍文娜 龚兴国 TANG Tian-tian;ZHOU Liang;JI Peng-fei;BAO Wen-na;GONG Xing-guo

作者机构：浙江大学生命科学学院生物化学研究所 

出 版 物：《浙江大学学报（理学版）》 (Journal of Zhejiang University（Science Edition）)

年 卷 期：2012年第39卷第5期

页      码：557-563页

摘      要：根据GeneBank中人乙醇脱氢酶ADH1B2基因序列设计引物,以人肝脏总RNA为模板,反转录获得人乙醇脱氢酶基因.将克隆基因与表达载体pPICZB连接,测序正确的pPICZB-ADH1B2电转化毕赤酵母GS115;重组毕赤酵母工程菌经0.5%(v/v)甲醇诱导72h后目的蛋白以可溶形式表达,经DEAE-Sepharose FF纯化后蛋白酶活性可达8 ***-1.同时构建重组质粒pCDNA3.1-ADH1B2转染HepG2人肝癌细胞,发现细胞内ROS/GSH水平降低,Akt磷酸化水平降低,细胞活性下降.为临床酒精中毒预防和治疗药物的研发以及ADH在肝脏肿瘤方面的研究提供了理论基础.

主 题 词：乙醇脱氢酶 毕赤酵母 酶活性 活性氧化物(ROS) 谷胱甘肽(GSH) Akt 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3785/j.issn.1008-9497.2012.05.013

馆 藏 号：203100154...