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锌指蛋白KOX12的克隆及表达

锌指蛋白KOX12的克隆及表达

作     者:陈颖 鸟越俊彦 廣橋良彦 沈敏 刘宝林 

作者机构:上海理工大学医疗器械与食品学院200093 上海杨浦区安图医院医学实验科200093 日本札幌医科大学病理教研室 

出 版 物:《放射免疫学杂志》 (Journal of Radioimmanology)

年 卷 期:2009年第22卷第5期

页      码:524-526页

摘      要:目的:在大肠杆菌中表达KOX12蛋白,为进一步研究它的功能奠定基础。方法:根据GenBank中KOX12的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR的方法从肺癌细胞株中扩增得到KOX12片段,将它克隆到PcDNA3.1F2/FOXM1质粒,然后经BamHI和XhoI双酶切,得到修饰过的KOX12基因片段,构建原核表达质粒PQE30/KOX12,以大肠杆菌M15为宿主菌表达目的蛋白,并采用Ni-NTA agarose亲和层析对目的蛋白进行了纯化。结果:构建了PQE30/KOX12原核表达体系,并检测到KOX12蛋白的有效表达。结论:成功地构建了原核表达质粒PQE30/KOX12并表达了KOX12蛋白,为进一步研究它的功能奠定了基础。

主 题 词:锌指蛋白 KOX12 表达 纯化 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 071007[071007] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1008-9810.2009.05.051

馆 藏 号:203100194...

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