钝顶螺旋藻表达载体p215 t-spp的构建及转化

作     者：王芬 叶霁 曹媛媛 张海生 甘旭华 唐欣昀 WANG Fen;YE Ji;CAO Yuan-yuan;ZHANG Hai-sheng;GAN Xu-hua;TANG Xin-yun

作者机构：安徽农业大学生命科学学院安徽合肥230036 

基　　金：安徽省教育厅自然基金项目(2006KJ173B 2007jq1052) 

出 版 物：《激光生物学报》 (Acta Laser Biology Sinica)

年 卷 期：2009年第18卷第1期

页      码：12-16页

摘      要：用合适的限制性内切酶消化载体p215 t,胶回收获得含有gfp基因及amp基因大片段。设计引物,采用PCR扩增无菌钝顶螺旋藻A9藻株的强启动子片段;在T4连接酶的作用下进行体外连接重组,构建了带有螺旋藻启动子和gfp报告基因的新型表达载体p215 t-spp。将该载体转入钝顶螺旋藻,利用报告基因的表达,在荧光显微镜下观察并记录转化藻细胞,p215 t-spp质粒显著提高转化率。研究了不同PEG浓度、转化时间及冰浴处理对转化率的影响。采用1%PEG能有效促进细胞吸收DNA,获得10.5‰的转化率。实验初步证明,带有螺旋藻启动子的报告基因gfp能够在钝顶螺旋藻中顺利表达。

主 题 词：钝顶螺旋藻 启动子 gfp基因 PEG转化 转化率 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-7146.2009.01.003

馆 藏 号：203100242...