小麦SBEⅡa、SSⅡa基因片段的克隆及VIGS重组载体的构建

作     者：李淼淼 南富波 刘伟 李卫华 LI Miao-miao;NAN Fu-bo;LIU Wei;LI Wei-hua

作者机构：石河子大学农学院/新疆兵团绿洲生态农业重点实验室新疆石河子832003 

基　　金：国家自然科学基金项目(31160279 31260357) 

出 版 物：《新疆农业科学》 (Xinjiang Agricultural Sciences)

年 卷 期：2013年第50卷第11期

页      码：1961-1966页

摘      要：【目的】克隆小麦SBEⅡa、SSⅡa基因部分序列并构建二者的VIGS重组载体,为在小麦上利用VIGS技术研究SBEⅡa、SSⅡa基因与小麦淀粉合成的关系奠定基础。【方法】根据GenBank中公布的小麦SBEⅡa(AF286319.1)、SSⅡa(AF155217.2)基因序列分别设计特异引物,利用RT-PCR技术克隆SBEⅡa、SSⅡa基因的特异片段。然后以BSMV:γ-PDS为原载体,通过酶切连接用SBEⅡa、SSⅡa基因片段分别将原载体中的PDS基因进行替换,从而构建BSMV:γ-SBEⅡa和BSMV:γ-SSⅡa重组载体。【结果】克隆的SBEⅡa和SSⅡa基因片段长分别是178 bp和171 bp。序列分析表明:SBEⅡa基因片段与小麦SBEⅡa(AF286319.1)序列同源性为100%;、SSⅡa基因片段与SSⅡa(AF155217.2)序列同源性也为100%;酶切鉴定结果表明成功构建BSMV:γ-SBEⅡa和BSMV:γ-SSⅡa重组载体。【结论】构建的BSMV:γ-SBEⅡa和BSMV:γ-SSⅡa重组载体将为下一步利用VIGS技术在小麦上研究SBEⅡa、SSⅡa基因与小麦淀粉合成的关系奠定基础。

主 题 词：小麦 SBEⅡa SSⅡa VIGS载体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0828[工学-建筑类] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.6048/j.issn.1001-4330.2013.11.001

馆 藏 号：203100380...