一种新的干扰素调节因子拼接异构体IRF-3b的结构及功能

作     者：周国平 陈吉庆 吴升华 陈晓禹 陈辉 ZHOU Guo-ping;CHEN Ji-qing;WU Sheng-hua;CHEN Xiao-yu;CHEN Hui

作者机构：南京医科大学附属江苏省人民医院儿科210036 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2005年第25卷第3期

页      码：199-203页

摘      要：目的　干扰素调节因子 (interferonregulatoryfactors ,IRF) 3是病毒感染后调节干扰素基因转录重要的转录因子 ,寻找IRF 3新的基因拼接异构体 ,研究其结构及功能。方法　抽提人类细胞RNA ,用IRF 3已发表序列设计引物 ,作cDNA末端快速放大 (RACE)及RT PCR ,生物信息学方法比较新序列 ,亚克隆IRF 3b至 pcDNA3.1 flag ,转染人胚胎肾上皮 2 93细胞 ,用抗flag抗体作Westernblot分析 ,用荧光素酶功能分析的方法观测IRF 3b对病毒诱导的干扰素 β启动子荧光素酶活性的影响。结果　发现了一种新的IRF 3拼接异构体IRF 3b ,IRF 3b用了紧接第七外显子前的 1 6个第六内含子的碱基 ,导致阅读框架移位 ,相应蛋白质的C端第 32 8～ 4 52位为不同于IRF 3的新C末端。Westernblot出现预期的相对分子质量 (Mr)为 57.75× 1 0 3的IRF 3b蛋白强阳性条带。新的外显子序列可在小鼠的表达序列标签 (EST)表达库中找到同源序列 ,提示这种新的异构体在生物演进中有其保守功能 ,IRF 3b荧光素酶功能分析显示 ,该同分异构体能抑制病毒诱导的干扰素 β启动子活性至对照组的 4 0 %～ 50 %。结论　新的异构体的发现为IRF 3这一重要分子的功能调节提供了新的线索 ,它可能是病毒感染通路中干扰素的显性负性抑制剂 ,提示其功能为干扰素产生的?

主 题 词：干扰素调节因子 异构体 结构 Western RT-PCR pcDNA3 荧光素酶活性 相对分子质量 表达序列标签 blot 病毒诱导 功能分析 病毒感染后 细胞RNA 生物信息学 293细胞 第七外显子 启动子活性 转录因子 基因转录 基因拼接 设计引物 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j:issn:0254-5101.2005.03.010

馆 藏 号：203100851...