实时荧光逆转录聚合酶链反应检测人类偏肺病毒方法的建立与应用

作     者：邢建明 翁学军 张甦 袁新华 沈翠芬 张雅琴 程红玲 李刚 姚丽惠 XING Jian-ming;WENG Xue-jun;ZHANG Su;YUAN Xin-hua;SHEN Cui-fen;ZHANG Ya-qin;CHENG Hong-ling;LI Gang;YAO Li-hui

作者机构：湖州市妇幼保健院浙江313000 湖州市中心医院 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：2008年第22卷第6期

页      码：510-512页

摘      要：目的建立一种快速、准确、特异的实时荧光逆转录聚合酶链反应方法（PCR），以检测人类偏肺病毒。方法根据Hmpv-L基因序列设计引物和探针并对实时荧光PCR反应体系进行优化，提取总RNA，通过随机引物进行反转录反应；产生的eDNA通过实时荧光PCR进行鉴定。进一步评价实时荧光反转录PCR方法的特异性、灵敏度、重复性，对180例临床样本进行检测。结果本实验所建立的实时荧光反转录PCR方法可准确、特异地检测人类偏肺病毒；该方法的灵敏度可达到1拷贝／μl；检测的批间和批内的变异系数均小于5％。180例肺炎和支气管炎患儿痰标本中共检测出28例人类偏肺病毒阳性，阳性率为15．56％（28／180）；肺炎患儿检出率为15．60％（17/109）；支气管炎患儿检出率为15．49％（11／71）。男性患儿检出率18．56％（18／97），女性患儿检出率12．05％（10／83）。患儿年龄小于2岁者检出率22．34％（21／94），2-5岁者检出率8．70％（6／69），大于5岁者检出率5．88％（1/17）。结论本研究建立的人类偏肺病毒实时荧光逆转录PCR方法快速、准确，结果可靠，实用性强；人类偏肺病毒已成为小儿呼吸道感染的重要病原体之一。

主 题 词：逆转录聚合酶链反应 变性肺病毒 偏肺病毒 检测方法 

学科分类：1006[医学-中西医结合类] 1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 100602[100602] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2008.06.037

馆 藏 号：203100973...