猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白基因的克隆及表达

作     者：刘斌 才学鹏 郭爱疆 贾万忠 骆学农 陈晓宇 刘振勇 丁军涛 刘英 LIU Bin;CAI Xue-peng;GUO Ai-jiang;JIA Wan-zhong;LUO Xue-nong;CHEN Xiao-yu;LIU Zhen-yong;DING Jun-tao;LIU Ying

作者机构：甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 

基　　金：国家高科技研究发展计划“863”项目(2006AA10A207) 甘肃省重大科技专项(2GS063-A43-013) 

出 版 物：《甘肃农业大学学报》 (Journal of Gansu Agricultural University)

年 卷 期：2009年第44卷第1期

页      码：27-31页

摘      要：根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸序列设计引物,用RT-PCR扩增出PRRSV甘肃株的核衣壳蛋白(N)基因,将N基因克隆至pGEM-T easy载体上,获得含N基因的阳性重组质粒pGEM-T easy-N.对质粒中的插入片段进行测序,应用DNAStar分析所测序列与GenBank中已登录的PRRSV毒株的同源性,再将其亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,得到重组表达载体pGEX-4T-1-N,转化***21(DE3)细胞,用SDS-PAGE检测表达产物,并对其进行纯化.结果表明:PRRSV甘肃株N基因核甘酸序列与PRRSV-VR2332株的同源性为93.3%,与欧洲LV株的同源性为66.1%;构建的重组表达载体在大肠杆菌中获得了成功表达,表达产物为40ku的可溶性融合蛋白.

主 题 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) N基因 克隆与表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1003-4315.2009.01.006

馆 藏 号：203100978...