嗜水气单胞菌弹性蛋白酶基因的克隆表达

作     者：孟喜龙 曹静 李玉保 赵志军 MENG Xi-long;CAO Jing;LI Yu-bao;ZHAO Zhi-jun

作者机构：聊城大学农学院山东聊城252059 

基　　金：山东省自然科学基金项目(Y2007D78) 山东省教育厅资助项目(J09LC70) 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2011年第4期

页      码：8-11页

摘      要：为了研究嗜水气单胞菌重组弹性蛋白酶的酶学性质,试验根据GenBank中的嗜水气单胞菌弹性蛋白酶基因ahyB设计1对含酶切位点的特异引物,以嗜水气单胞菌J-1(AhJ-1)株为模板,经PCR扩增得到不含信号肽的成熟弹性蛋白酶基因片段(787 bp),并与pMD18-T载体连接、测序,再用DNAStar软件分析。结果表明:该基因片段与豚鼠气单胞菌胞外蛋白酶同源性高达95%,与嗜水气单胞菌AG2株弹性蛋白酶ahyB基因同源性为92%,与铜绿假单胞菌LasB基因同源性为82%;将PCR产物连入表达载体pET-32a,转化至大肠杆菌BL21菌株中进行诱导表达,出现50 ku的融合表达蛋白,该表达产物纯化复性后表现出酶的活性。

主 题 词：嗜水气单胞菌弹性蛋白酶 克隆表达 酶活性 

学科分类：08[工学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 0836[0836] 090501[090501] 

D　O　I：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2011.07.001

馆 藏 号：203101080...