不同毒力番鸭呼肠孤病毒双重PCR鉴别方法的建立

作     者：周五朵 朱二鹏 蔡一龙 温亚萍 吴异健 吴宝成 王全溪 ZHOU Wuduo;ZHU Erpeng;CAI Yilong;WEN Yaping;WU Yijian;WU Baocheng;WANG Quanxi

作者机构：福建农林大学动物科学学院福建福州350002 

基　　金：福建省教育厅科技计划项目(JA12117) 

出 版 物：《中国家禽》 (China Poultry)

年 卷 期：2014年第36卷第6期

页      码：14-17页

摘      要：自2001年我国出现番鸭感染呼肠孤病毒(MDRV)报道以来,本课题组从病鸭体内分离到2株在临床上致病力差别很大的病毒毒株,并分别命名为YJL株和YB株。本研究根据这2株病毒基因特点,分别针对YB株P10蛋白基因和YJL株P17蛋白基因设计2对特异性引物,通过条件优化建立了鉴别2个毒株的双重PCR。结果显示:该方法可同时扩增出YB 288 bp、YJL 441 bp长度的特异性片段,而对其他番鸭病病原无扩增结果;该方法最佳反应条件为95℃5 min,94℃1 min,55℃45 s,72℃1 min,30个循环,72℃延伸10 min;该方法最低能检出10 pg YB和YJL株RNA模板;使用单重PCR和多重PCR方法对60份临床病料检测验证,两者符合率为100%。结果表明该方法特异性、敏感性和重复性良好,具有快速、准确的特点,可用于这2种不同毒力毒株的鉴别。

主 题 词：番鸭呼肠孤病毒 双重PCR 鉴别 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-6364.2014.06.005

馆 藏 号：203101215...