白蜡属SSR-PCR反应体系优化及引物筛选

作     者：王健兵 燕丽萍 刘翠兰 李丽 孙超 夏阳 屈星 

作者机构：甘肃农业大学农学院兰州730070 山东省林业科学研究院济南250014 山东省林木遗传改良重点实验室济南250014 

基　　金：山东省良种工程农业生物资源创新利用研究项目(鲁农良种字117号) 

出 版 物：《中国农学通报》 (Chinese Agricultural Science Bulletin)

年 卷 期：2014年第30卷第10期

页      码：35-41页

摘      要：本研究建立了适合白蜡SSR-PCR反应的最佳体系，并利用该体系从50对白蜡引物中筛选出了3对条带清晰、多态性好的引物，用于白蜡SSR标记的进一步研究。该研究采用L16（4^5）正交设计和单因素试验对影响白蜡SSR-PCR的Taq聚合酶用量、Mg2＋浓度、DNA模板浓度、dNTP浓度和引物浓度等5个因素在4水平上进行筛选。优化后的白蜡SSR反应体系为：Mg2＋（25mmol／L）0．8μＬ、引物（10μmol／L）0．2μL、DNTP（10mmol／L）0．3μL、Taq酶（5U／μL）0．05μL、DNA模板（5-10ng／μL）2．00μL、10×PCR缓冲液1．0μL，ddH2O 5．45μL，总体积10．0μL。该结果为今后利用SSR-PCR标记技术研究分析白蜡奠定了基础。

主 题 词：白蜡 SSR-PCR 体系优化 引物筛选 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 

馆 藏 号：203101221...