Nrf2基因过表达对百草枯诱导的骨髓间充质干细胞损伤的影响

作     者：蔡晓霞 陈燕珍 周挺 赵光举 邱俏檬 洪广亮 卢阳 卢中秋 Cai Xiaoxia;Chen Yanzhen;Zhou Ting;Zhao Guangju;Qiu Qiaomeng;Hong Guangliang;Lu Yang;Lu Zhongqiu

作者机构：温州医科大学附属第一医院急诊医学中心浙江省温州325000 

基　　金：浙江省医药卫生科技计划项目(2012-ZD-A033) 浙江省“十二五”重点学科建设计划资助项目 浙江省医学创新学科计划项目(11-CX26) 浙江省中医药重点学科计划项目(2012-XK-A28) 

出 版 物：《中华急诊医学杂志》 (Chinese Journal of Emergency Medicine)

年 卷 期：2015年第24卷第8期

页      码：851-856页

摘      要：目的观察核因子E2相关因子2转录因子（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nri2）基因过表达对百草枯（paraquat，PQ）诱导的骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem ceils，BMSCs）损伤的影响。方法BMSCs随机（随机数字法）分为6组：正常BMSCs组、BMSCs-mCherry（红色荧光蛋白）组、BMSCs-Nrf2组、BMSCs＋PQ组、***＋PQ组、BMSCs-Nrf2＋PQ组。正常BMSCs组、BMSCs—mCherry组、BMSCs-Nrf2组：正常培养基培养；BMSCs＋PQ组、BMSCs-mCherry＋PQ组、BMSCs—Nrf2＋PQ组：终浓度1．0mmol／L的PQ培养。24h之后收集细胞及上清液，蛋白免疫印迹法（westernblot）检测胞核内Nrf2蛋白量，CCK-8法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，化学比色法检测上清液脂质过氧化产物丙二醛（MDA）的含量及过氧化氢酶（CAT）的活性，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测上清液白细胞介素_6（IL-6）、IL-10及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量。数据通过SPSS20．0进行统计学分析，组间比较采用单因素方差分析。结果BMSCs—mCherry＋PQ组与BMSCs＋PQ组比较，各测定数据差异无统计学意义（P〉0．05）。与BMSCs组比较，BMSCs＋PQ组细胞核Nrf2蛋白表达量明显上升（P=0．008）；与BMSCs＋PQ组比较，BMSCs—Nrf2＋PQ组Nrf2蛋白表达量升高（P=0．031）。与BMSCs组比较，BMSCs＋PQ组细胞存活率明显下降，细胞凋亡率明显升高（P=0．000）；与BMSCs＋PQ组比较，BMSCs-Nri2＋PQ组细胞存活率明显升高[（53．27±2．40）％掷．（75．20±2．92）％，P=0．000]，凋亡数量显著降低[（26．43±2．21）％郴．（16．30±1．73）％，P=0．000]。与BMSCs组比较，BMSCs＋PQ组MDA、IL-6、TNF．0L水平明显上升，CAT、IL-10水平明显降低（P=0．000）；与BMSCs＋PQ组比较，BMSCs—Nrf2＋PQ组MDA含量明显降低[（43．88±0．89）nmol／L138．（37．29±1．88）nmol／L，P=0．000]，上清液CAT活力明显升高[（22．82±0．63）U／mL掷．（38．45±1．24）U／mL，P=0．000]，IL-6蛋白含量显著降低[（75．57±11．63）pg／mLvs．（52．00±5．87）pg／mL，P=0．001]，IL-10的蛋白含量明显升高[（6．96±0．93）pg／mLvs．（15．59±1．73）pg／mL，P=0．000]，TNF-α的蛋白含量显著降低[（164．51±9．29）pg／mLvs．（124．62±2．95）pg／mL，P=0．000]。结论Nrf2基因可明显提高BMSCs细胞核Nrf2蛋白的基础表达量，上调Nrf2-ARE通路的表达活性，抵抗PQ对BMSCs的损伤作用。

主 题 词：Nrf2 百草枯 骨髓间充质干细胞 氧化应激 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1011[医学-护理学类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2015.08.009

馆 藏 号：203101288...