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虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR检测方法的建立

虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR检测方法的建立

作     者:李林翔 韦增晖 张晓明 彭仕明 陈武 Li Linxiang;Wei Zenghui;Zhang Xiaoming;Peng Shiming;Chen Wu

作者机构:苏州市动物园苏州215001 广东工业大学广州510006 广州动物园广州510070 广州海洋馆广州510070 

基  金:中国动物园协会2013年科研项目"虎源传染性鼻气管炎的快速诊断与新型疫苗的研究" 

出 版 物:《野生动物学报》 (CHINESE JOURNAL OF WILDLIFE)

年 卷 期:2015年第36卷第4期

页      码:369-372页

摘      要:为了建立虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR(nested PCR)的快速鉴定方法,根据虎源传染性鼻气管炎病毒(FHV-1)的gD蛋白基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性和重复性实验,特异性试验表明,该方法可以特异扩增出FHV-1的gD基因片断,从猫泛白细胞减少症病毒、猫支原体和阴性对照的VERO细胞均未扩增出该条带,敏感性试验表明,nested PCR检测极限是1×10~2 copies/μl,而一步法PCR的有效扩增最低极限是1×10~5 copies/μl,前者的敏感性明显高于后者,重复性实验表明,不同情况下3次重复性试验,结果相同。用nested PCR对疑似感染FHV-1的样品进行检测,实验结果与病毒分离鉴定结果一致。本研究建立的nested PCR适用于野生猫科动物FHV-1感染的快速诊断与流行病学调查。

主 题 词:虎源传染性鼻气管炎病毒 巢式PCR 一步法PCR gD基因 

学科分类:0907[农学-草药学] 090705[090705] 09[农学] 

D O I:10.19711/j.cnki.issn2310-1490.2015.04.001

馆 藏 号:203101302...

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