稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的卵巢癌OVCAR3细胞系的建立与鉴定

作     者：董梦梦 孙倩玲 张灵芝 黄梦庭 卢红艳 张佳乐 袁成福 DONG Meng-meng;SUN Qian-ling;ZHANG Ling-zhi;HUANG Meng-ting;LU Hong-yan;ZHANG Jia-le;YUAN Cheng-fu

作者机构：三峡大学医学院生物化学教研室湖北宜昌443002 

基　　金：国家自然科学基金(81550029 30800410) 三峡大学人才启动基金(KJ2014B064) 三峡大学教学研究重点项目(J2015023) 湖北省自然科学基金(2015CFB198) 大学生科技创新重点项目(2015YCX004) 

出 版 物：《基础医学与临床》 (Basic and Clinical Medicine)

年 卷 期：2016年第36卷第3期

页      码：301-306页

摘      要：目的建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的卵巢癌OVCAR3细胞系并研究CKS2敲除对卵巢癌OVCAR3细胞增殖的影响。方法根据siRNA的原理设计2对靶向CKS2的shRNA序列,构建慢病毒表达质粒(p LVTHM/CKS2 shRNA重组质粒);先用p LV-t TR/KRAB-Red空载体制备慢病毒并感染OVCAR3细胞;在此基础上再用p LVTHM/CKS2 shRNA重组质粒制备慢病毒并感染上述OVCAR3细胞;对上述两次慢病毒感染的OVCAR3细胞,用强力霉素(DOX)处理72 h后,用real time PCR及Western blot检测CKS2 mRNA及蛋白的表达;用MTT法检测细胞增殖。结果构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达质粒,包装出慢病毒并感染OVCAR3细胞;建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的OVCAR3细胞系,通过DOX诱导,可明显抑制该细胞系中CKS2在mRNA及蛋白水平的表达(P<0.05,P<0.01);CKS2敲除可明显抑制OVCAR3细胞的增殖。结论建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的OVCAR3细胞系,DOX诱导的CKS2敲除可明显抑制OVCAR3细胞增殖。

主 题 词：CKS2 可诱导型shRNA 卵巢癌 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16352/j.issn.1001-6325.2016.03.003

馆 藏 号：203101309...