针对Cox-2基因siRNA载体构建和沉默效应

作     者：赵国新 徐慧丹 赵新合 冯龙 卫艳萍 胡军 

作者机构：河南省医学科学研究所免疫室河南郑州450052 淮阳卫生学校河南淮阳466700 郑州市武警支队卫生队河南郑州450052 郑州大学基础医学院河南郑州450052 

基　　金："十五""211工程"重点学科建设项目(教重办2002第2号) 

出 版 物：《河南科技大学学报（医学版）》 (Journal of Henan University of Science & Technology:Medical Science)

年 卷 期：2007年第25卷第1期

页      码：1-4页

摘      要：目的构建针对人Cox-2基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,观察RNA干扰对肺癌细胞Cox-2基因表达的沉默作用。方法设计Cox-2靶向的发夹状siRNA,依据设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSINsi-hU6载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体包裹转染人肺癌细胞NCI-H446,采用RT-PCR检测Cox-2基因mRNA表达的变化。结果把针对Cox-2基因的siRNA的双链寡核苷酸片段克隆入pSINsi-hU6载体,经过酶切鉴定与测序,结果正确;RT-PCR检测显示,Cox-2基因的表达水平明显降低。结论成功构建出显著沉默细胞Cox-2基因表达的siRNA载体。

主 题 词：RNA干扰 Cox-2 RT-PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-688X.2007.01.001

馆 藏 号：203101510...