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以马铃薯ND2 mRNA为内对照双重RT-PCR法检测马铃薯纺锤块茎类病毒

以马铃薯ND2 mRNA为内对照双重RT-PCR法检测马铃薯纺锤块茎类病毒

作     者:马恢 谢晓亮 尹江 温春秀 吴志明 MA Hui;XIE Xiao-liang;YIN Jiang;WEN Chun-xiu;WU Zhi-ming

作者机构:河北省高寒作物研究所河北张家口076450 河北省农林科学院经济作物研究所石家庄050051 

基  金:河北省科技攻关项目(04225505) 

出 版 物:《园艺学报》 (Acta Horticulturae Sinica)

年 卷 期:2007年第34卷第5期

页      码:1213-1216页

摘      要:根据马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计特异引物,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行PSTVd检测研究。为避免由于提取的RNA降解或者RT-PCR反应质量不高所造成的假阴性问题,在检测过程中引入马铃薯线粒体NADH脱氢酶ND2亚基基因mRNA为内对照,该内对照的一个引物跨越了该基因内含子区域,只对剪接后的mRNA进行特异扩增而不扩增其本身DNA。利用内对照引物和PSTVd特异引物进行双重RT-PCR检测,分别扩增出190 bp的内对照基因特异片段和360 bp的PSTVd特异条带,与预期引物设计大小一致。引入的内对照可以较好地监控PSTVd的RT-PCR检测过程。

主 题 词:马铃薯 马铃薯纺锤块茎类病毒 双重RT-PCR 马铃薯线粒体 NADH ND2 mRNA 

学科分类:09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0513-353x.2007.05.024

馆 藏 号:203101625...

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