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中药材鹿心分子鉴定方法及检测试剂的研究

中药材鹿心分子鉴定方法及检测试剂的研究

作     者:王艳双 姜海瀛 刘美琳 高丽君 李明成 孙丽媛 张丽华 艾金霞 WANG Yan-shuang;JIANG Hai-ying;LIU Mei-lin;GAO Li-jun;LI Ming-cheng;SUN Li-yuan;ZHANG Li-hua;AI Jin-xia

作者机构:北华大学医学院吉林吉林132013 北华大学医学技术学院吉林吉林132013 北华大学吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林吉林132013 吉林雷宁食品药品检测技术服务有限公司吉林吉林132013 

基  金:吉林省发改委项目(2018C048-2) 吉林省科技发展计划项目(20180201023YY,20190303093SF,20190301014NY,20200404152YY,20200403047SF) 吉林省科技创新中心建设项目(20190902018TC) 

出 版 物:《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期:2021年第52卷第2期

页      码:544-551页

摘      要:目的建立中药材鹿心DNA指纹鉴定方法,研发鹿心DNA检测试剂盒。方法以梅花鹿和马鹿mtDNA Cytb基因作为靶基因,设计小片段特异性引物,研制鹿心DNA提取及PCR检测试剂;应用分子克隆及测序技术,克隆鹿心对照药材;并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察;对市售鹿心样品进行真伪鉴定。结果自主研发的试剂提取鹿心的DNA浓度纯度均达到PCR的要求;在退火温度为63℃时引物的特异性最强;克隆测序后的鹿心DNA序列与鹿心mtDNA Cytb特异指纹区段序列一致;自主研发的试剂重现性、稳定性良好,灵敏度达到0.5%;对市售30个鹿心样品进行检测,伪品率为40%。结论建立的鹿心DNA指纹鉴定方法特异、准确、可靠,研制的鹿心DNA检测试剂盒操作简便、结果稳定。

主 题 词:鹿心 DNA指纹鉴定 DNA检测试剂盒 分子克隆 测序技术 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1008[医学-中药学类] 1007[医学-药学类] 1006[医学-中西医结合类] 1005[医学-中医学类] 1002[医学-临床医学类] 0703[理学-化学类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.7501/j.issn.0253-2670.2021.02.028

馆 藏 号:203101667...

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