应用多重Digoxigenin标记探针在核酸斑点杂交检测中识别Ⅰ群禽腺病毒的感染

作     者：侯力丹 张亚文 苏奇 刘丹 毛娅卿 王嘉 黄小洁 赵鹏 李俊平 杨汉春 HOU Li-dan;ZHANG Ya-wen;SU Qi;LIU Dan;MAO Ya-qing;WANG Jia;HUANG Xiao-jie;ZHAO Peng;LI Jun-ping;YANG Han-chun

作者机构：中国兽医药品监察所北京100081 中国农业大学动物医学学院北京100193 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 

基　　金：国家重点研发计划资助项目(2016YFD0500800 2016 YFD0500809) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2020年第40卷第12期

页      码：2305-2310页

摘      要：禽腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)是鸡群中常见的免疫抑制性病毒,其中Ⅰ群FAdV有12个血清型(FAdV1-8a,8b-FAdV11),这为Ⅰ群FAdV检测带来了挑战。为开发一种可以同时检测Ⅰ群FAdV的Digoxigenin标记核酸探针或者其组合,本研究针对Ⅰ群FAdV的hexon基因保守区域设计引物,分别以12个血清型的Ⅰ群FAdV参考毒株DNA为模板合成了12种Digoxigenin标记核酸探针,并将这12种核酸探针及其组合形成的多重探针共13种探针分别与同一杂交膜上的12种不同血清型Ⅰ群FAdV参考毒株的毒株核酸进行杂交,观察各探针或其组合能够识别的最大限度。结果显示,12种血清型对应的单一核酸探针能检测和识别的病毒类型及其灵敏度差异较大,而多重探针组合PM可以同时检测出所有12种血清型毒株并体现出最高灵敏度的优势。本研究建立了应用多重Digoxigenin标记探针组合在核酸斑点杂交检测中识别Ⅰ群FAdV核酸的新方法,为解决类似病毒高通量检测提供了新的思路。

主 题 词：Ⅰ群禽腺病毒 hexon基因 Digoxigenin 核酸斑点杂交 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.12.05

馆 藏 号：203101698...