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猪伪狂犬病病毒野毒LNA探针real-time PCR检测方法的建立

猪伪狂犬病病毒野毒LNA探针real-time PCR检测方法的建立

作     者:李艳 楚品品 雷雯 勾红潮 蒋智勇 蔡汝健 宋帅 卞志标 杨东霞 李春玲 LI Yan;CHU Pinpin;LEI Wen;GOU Hongchao;JIANG Zhiyong;CAI Rujian;SONG Shuai;BIAN Zhi-biao;YANG Dongxia;LI Chunling

作者机构:广东省农业科学院动物卫生研究所广州510640 广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广州510640 农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640 广东省妇幼保健院广州510010 

基  金:广东省科技计划项目(2017A030303043) 广东省重点研发项目(2019B020217002) 广东省农业厅项目(2018LM2180) 

出 版 物:《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期:2021年第29卷第1期

页      码:36-41页

摘      要:本研究根据猪伪狂犬病病毒gE基因保守区域设计特异性引物和LNA-TaqMan探针,建立了基于LNA-TaqMan探针的猪伪狂犬病病毒野毒株荧光定量PCR检测方法。结果显示:所建立的方法能够特异性的检测出猪伪狂犬病病毒野毒株;灵敏度更高,最低检测下限为10个拷贝/μL;批内变异系数和批间变异系数分别为0.43%~0.64%、0.44%~2.34%,重复性良好。对67份临床样品进行检测,病毒分离培养法检测出23份阳性样品,LNA-TaqMan探针荧光定量PCR方法检测出26份阳性样品,常规TaqMan探针法检测出21份阳性样品,与病毒分离法比较,LNA-TaqMan探针法的符合率为96%。本研究建立的基于LNA-TaqMan探针检测猪伪狂犬病病毒野毒株的荧光定量PCR方法,为猪伪狂犬病的诊断和流行病学调查提供了可靠的技术支持。

主 题 词:猪伪狂犬病病毒 gE基因 LNA探针 实时荧光定量PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号:203101810...

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