HIV-1病毒样颗粒真核表达系统的建立

作     者：许丹 郑瑾 孙丽娜 耿宜萍 李旭 王一理 XU Dan;ZHENG Jin;SUN Li-na;GEN Yi-ping;LI Xu;WANG Yi-li

作者机构：西安交通大学生物医学信息工程教育部重点实验室/西安交通大学疫苗研发中心陕西西安710061 

基　　金：国家自然科学基金(30371291) 

出 版 物：《西北大学学报（自然科学版）》 (Journal of Northwest University（Natural Science Edition）)

年 卷 期：2008年第38卷第1期

页      码：93-95,98页

摘      要：目的利用哺乳动物细胞表达HIV-1病毒样颗粒,为HIV-1病毒的生物学研究和进一步设计HIV-1中和优势表位预防性疫苗奠定基础。方法以293T细胞作为宿主细胞,利用磷酸钙沉淀法将带有HIV-1病毒被膜蛋白gp160基因的pcDNA3.1/BaL gp160真核表达载体和带有HIV-1核心蛋白(gag)的pVRC3900真核表达载体共转染至293T细胞中,收集培养上清,经蔗糖不连续梯度离心,收集病毒样颗粒,经磷钨酸负染,透射电镜观察结果。结果以磷酸钙沉淀DNA转移技术,EGFP真核表达质粒为靶基因,293T细胞为宿主细胞,最佳转染效率达30%以上;将pcDNA3.1/ BaL gp160(env)和pVRC3900(gag)真核表达质粒共转染,宿主细胞成功表达目的蛋白,转染细胞培养上清经蔗糖密度梯度离心,电镜观察可见自行装配的HIV病毒样颗粒。结论在真核细胞中表达HIV-1病毒样颗粒。

主 题 词：HIV病毒样颗粒 真核表达 磷酸钙沉淀法 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16152/j.cnki.xdxbzr.2008.01.024

馆 藏 号：203101893...