补肾活血中药对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响(英文)

作     者：曾意荣 樊粤光 刘红 夏雄智 范海蛟 Zeng Yi-rong;Fan Yue-guang;Liu Hong;Xia Xiong-zhi;Fan Hai-jiao

作者机构：广州中医药大学第一附属医院髋中心广东省广州市510405 

基　　金：2004 年广东省中医药局基金项目(1040015)~~ 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2008年第12卷第8期

页      码：1581-1585页

摘      要：背景：骨髓间充质干细胞因其获取容易、创伤微小、具有无限扩增和多分化潜能、自体移植不存在免疫排斥反应而受到医学研究者的青睐。目的：体外分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞，观察不同浓度补肾活血中药含药血清对其增殖的影响。设计：完全随机对照的动物实验。单位：广州中医药大学第一附属医院髋中心。材料：选用健康雄性SD大鼠40只，SPF级，体质量170-180g，由广州中医药大学实验动物中心提供。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。将实验动物按随机数字表分为4组，正常对照组和高、中、低剂量给药组，每组10只.方法：实验于2005-01/03在广州中医药大学实验动物中心完成。采用Percoll密度梯度离心法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞，体外培养，建立大鼠骨髓间充质干细胞培养体系。高、中、低剂量给药组大鼠分别灌胃补肾活血中药4.4，2．2和1．1g/kg，分别相当临床成人用量的20，10和5倍。正常对照组灌胃纯净水。连续给药1周。末次给药1h后，无菌条件下，腹主动脉取血6mid只，2000r／min离心15min，收集血清。高、中、低剂量给药组用10％大鼠含药血清代替10％的牛血清，正常对照组的培养基加入10％的血清。每天观察并记录细胞生长情况，绘制生长曲线。主要观察指标：①骨髓间充质干细胞的生长状况。②HE染色和吉姆萨染色观察骨髓间充质干细胞形态。③免疫细胞化学法检测骨髓间充质干细胞的抗原表达。④不同浓度含药血清对骨髓间充质干细胞生长情况的影响。结果：①骨髓间充质干细胞的生长状况：原代培养的骨髓细胞24h后开始贴壁，7d后可达80％融合。②骨髓间充质干细胞的一般形态：骨髓间充质干细胞的细胞多成长梭形或多角形，细胞体积小，胞核位于胞中或稍偏，核浆比略大。③髓间充质干细胞的抗原表达：单个核细胞的胞浆中有CD44表达，着蓝色，部分骨髓间充质干细胞表达c—Kit，在表型表达和细胞形态上具备骨髓间充质干细胞特征。④补肾活血中药对骨髓间充质干细胞生长曲线的影响：高、中、低剂量给药组在加入补肾活血中药血清3d后，骨髓间充质干细胞数量比空白对照组明显增多，并与剂量呈正比。结论：补肾活血中药含药血清能促进骨髓间充质干细胞的体外增殖。

主 题 词：骨髓间充质干细胞 补肾活血中药 免疫细胞化学法 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1007[医学-药学类] 0403[0403] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 1010[医学-医学技术类] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0836[0836] 

馆 藏 号：203101917...