非洲猪瘟病毒实时荧光RAA检测方法的建立

作     者：赵凯颖 曾德新 胡永新 钱炳旭 薛峰 钱莺娟 吴晓东 戴建君 ZHAO Kai-ying;ZENG De-xin;HU Yong-xin;QIAN Bing-xu;XUE Feng;QIAN Ying-juan;WU Xiao-dong;DAI Jian-jun

作者机构：南京农业大学动物健康与食品安全国际合作实验室江苏南京210095 中国动物卫生与流行病学中心国家非洲猪瘟参考实验室山东青岛266000 

基　　金：国家重点研发计划项目(2017YFF0208600) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2021年第51卷第1期

页      码：1-8页

摘      要：为了建立非洲猪瘟病毒(ASFV)简捷、高效的基层临床检测方法,本研究选取非洲猪瘟病毒保守基因B646L(P72)序列,设计特异性引物和探针,建立非洲猪瘟病毒实时荧光重组酶介导等温扩增(RAA)检测方法。结果显示,所建立方法与OIE推荐的荧光定量PCR方法灵敏度相当,低至10 copies,μL,检测时长仅需10 min,与口蹄疫病毒(FMDV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)均无交叉反应。对100份临床样品的检测结果与OIE推荐的荧光定量PCR结果一致,但相较于荧光定量PCR检测时间的2h,检测时间大大缩短。结果表明,本研究建立的方法灵敏度较高、特异性较好,为ASFV早期临床诊断提供了技术支持。

主 题 词：非洲猪瘟病毒 重组酶介导等温扩增方法 检测 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0004

馆 藏 号：203101929...