人工microRNAs对拟南芥At1g13770和At2g23470基因的特异沉默

作     者：李文超 赵淑清 LI Wen-Chao;ZHAO Shu-Qing

作者机构：山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室太原030006 

基　　金：山西省国际科技合作计划(编号:2009081005) 山西省留学人员科技活动项目择优资助项目 山西省回国留学人员科研资助项目(编号:201003) 太原市科技明星专项(编号:11014902)资助 

出 版 物：《遗传》 (Hereditas（Beijing))

年 卷 期：2012年第34卷第3期

页      码：348-355页

摘      要：DUF647(Domain of unknown function 647)蛋白家族是在真核生物中广泛存在的、高度保守的蛋白家族。拟南芥中该基因家族共有6个成员,迄今为止拟南芥DUF647家族中4个成员的功能尚不清楚。文章以拟南芥内源MIR319a前体为骨架,构建了敲减DUF647家族中2个基因At1g13770和At2g23470表达的人工microRNAs(Artifical microRNAs,amiRNAs)。利用WMD(Web microRNA designer)平台设计分别靶向At1g13770和At2g23470基因的amiRNAs序列,通过重叠PCR置换拟南芥MIR319a前体序列。构建融合amiRNAs前体的植物表达载体pCHF3-amiRNAs,在农杆菌介导下转化拟南芥。RT-PCR分析表明,amiRNAs能够显著抑制At1g13770和At2g23470基因的表达,获得了抑制效果明显的转基因株系。At2g23470-amiRNA转基因植株At2g23470转录水平的下调导致育性严重下降。文章为进一步研究这两个基因的功能奠定了良好的基础。

主 题 词：拟南芥 DUF647基因家族 人工microRNA 基因沉默 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/sp.j.1005.2012.00348

馆 藏 号：203101943...