自噬标志物LC3的节律表达破坏参与β_(1)-AA诱导的H9c2大鼠心肌细胞死亡

作     者：贾微微 宁娜 孙聪 李朋佳 陆洁蓓 张晟 原媛 王丽 王晓晖 JIA Wei-wei;NING Na;SUN Cong;LI Peng-jia;LU Jie-bei;ZHANG Sheng;YUAN Yuan;WANG Li;WANG Xiao-hui

作者机构：山西医科大学基础医学院病理教研室山西太原030001 山西医科大学基础医学院形态学实验室山西太原030001 山西医科大学基础医学院基础医学研究中心山西太原030001 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.31871177) 山西省高等学校优秀成果(科学技术)培育项目(No.2020KJ034) 山西省研究生教育创新项目(No.2020SY230) 山西省“1331工程”重点学科建设计划经费资助 

出 版 物：《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期：2021年第37卷第1期

页      码：10-17页

摘      要：目的:探讨β_(1)-肾上腺素受体(β_(1)-AR)自身抗体(β_(1)-AA)对大鼠心肌细胞自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)节律表达的影响及其在心肌细胞死亡中的作用。方法:实验材料为Sprague-Dawley(SD)大鼠和H9c2大鼠心肌细胞。将SD大鼠随机分为免疫组(β_(1)-AR组)和对照(control)组,每组6只;将H9c2细胞随机分为control组、β_(1)-AA组、慢病毒(LV)-NC组和LV-shPer2组(n=6);合成β_(1)-AR细胞外第二环抗原肽段,用于主动免疫大鼠,并使用亲和层析法从大鼠血清中提纯β_(1)-AA;β_(1)-AA处理H9c2细胞24 h后使用CCK-8法检测细胞活力;用地塞米松同步化细胞后,再给予β_(1)-AA处理,采用real-time PCR及Western blot法检测LC3的表达情况,采用Western blot法检测生物钟蛋白Per2的表达情况,使用JTK_CYCLE算法分析昼夜节律参数;用LV-shPer2感染H9c2细胞以破坏LC3的节律表达,进而采用CCK-8法检测细胞活力。结果:β_(1)-AR组大鼠血清中β_(1)-AA的A值与control组相比显著升高(P<0.05)。β_(1)-AA组H9c2细胞的活力显著低于control组(P<0.05)。β_(1)-AA可破坏H9c2细胞LC3和Per2的节律表达(JTK_CYCLE P<0.05)。通过LV-shPer2干扰Per2基因而破坏H9c2细胞LC3节律表达(JTK_CYCLE P<0.05)后,细胞活力显著降低(P<0.05)。结论:β_(1)-AA破坏H9c2大鼠心肌细胞自噬标志物LC3的节律表达,从而促进细胞死亡。

主 题 词：心肌细胞 β_(1)-肾上腺素受体自身抗体 微管相关蛋白1轻链3 昼夜节律 自噬 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100201[100201] 100104[100104] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-4718.2021.01.002

馆 藏 号：203101971...