猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒抗原含量实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：李雪峰 康斌 赵炳武 武玉梅 戴伶俐 董鹏 张建春 张春阳 斯琴高娃 LI Xue-feng;KANG Bin;ZHAO Bing-wu;WU Yu-mei;DAI Ling-li;DONG Peng;ZHANG Jian-chun;ZHANG Chun-yang;Siqingaowa

作者机构：金河佑本生物制品有限公司内蒙古呼和浩特011517 内蒙古自治区农牧业科学院内蒙古呼和浩特010031 杭州佑本动物疫苗有限公司浙江杭州310018 

出 版 物：《畜牧与饲料科学》 (Animal Husbandry and Feed Science)

年 卷 期：2021年第42卷第1期

页      码：8-13页

摘      要：依据GenBank公布的猪圆环病毒2型Cap基因序列,在保守区域设计特异性引物和TaqMan探针,优化反应体系,建立评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,并验证灭活剂用量和灭活时间对检测结果的影响。结果显示:该方法只对猪圆环病毒2型基因有特异性扩增,其他3种对照病毒基因的扩增结果均为阴性;检测灵敏度达到102.0 TCID50/mL,比普通PCR方法高100倍;方法的重复性好,对同一样品进行10次检测,变异系数为2.28%;不同灭活剂用量和灭活时间对结果的影响较小,不会因各厂家使用的灭活剂用量和灭活时间不同,影响疫苗对比实验的公平性。该研究成功建立了一种评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,用于猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中病毒抗原含量的定量,其结果可以反映不同猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中抗原含量差异,为研究猪圆环病毒2型灭活疫苗病毒抗原含量评估方法提供了新的思路。

主 题 词：实时荧光定量PCR 猪圆环病毒2型 灭活疫苗 Cap基因 

学科分类：090601[090601] 090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.12160/j.issn.1672-5190.2021.01.002

馆 藏 号：203101976...