抗Ⅰ型鸭肝炎病毒单链抗体库的构建与筛选

作     者：韩宜均 孙举 原昆鹏 曲雪婷 栾庆东 尹燕博 王建琳 HAN Yijun;SUN Ju;YUAN Kunpeng;QU Xueting;LUAN Qingdong;YIN Yanbo;WANG Jianlin

作者机构：青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 

基　　金：国家重点研发计划项目(2016YFD0500800) 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2021年第3期

页      码：91-96页

摘      要：为了构建和筛选抗Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)单链抗体库,试验用Ⅰ型鸭肝炎疫苗免疫樱桃谷鸭,以分离的外周血淋巴细胞总RNA为模板,根据抗体保守区序列设计引物,通过RT-PCR技术扩增出鸭IgG轻链可变区和重链可变区基因,由Linker序列连接,用重叠延伸PCR(SOR-PCR)技术将其连接成单链抗体基因,将扩增的单链抗体基因导入pComb3XSS载体中构建抗DHV-Ⅰ噬菌体单链抗体库,并对该噬菌体单链抗体库进行3次吸附-洗脱-富集。结果表明:试验成功构建出库量为8.5×109pfu/mL的抗DHV-Ⅰ噬菌体单链抗体库,筛选出1株亲和力较高的抗DHV-Ⅰ噬菌体单链抗体。说明试验成功构建了鸭源抗DHV-Ⅰ噬菌体单链抗体库,筛选出1株与DHV-Ⅰ亲和力良好的鸭源噬菌体单链抗体。

主 题 词：Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ) 噬菌体抗体库 单链抗体(ScFv) 构建 筛选 纯化 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2020.03.0907

馆 藏 号：203102038...