均匀设计优化新疆主要葡萄品种ISSR-PCR反应体系

作     者：彭媛媛 高展 艾克拜尔·毛拉 周龙 Peng Yuanyuan;Gao Zhan;Maola Aikebaier;Zhou Long

作者机构：新疆农业大学林学与园艺学院乌鲁木齐830052 

基　　金：新疆维吾尔自治区科技计划重大专项(2017A01001) 自治区级研究生创新项目(XJ2019G161) 新疆农业大学2612创新团队(XJAU201528) 新疆维吾尔自治区园艺学重点学科项目(2016-10758-3)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2021年第19卷第2期

页      码：539-545页

摘      要：为了建立适用于新疆主要葡萄品种的ISSR-PCR反应体系,本研究以新疆不同葡萄品种DNA为模板,采用均匀设计法,对影响ISSR-PCR体系的Mg^2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶等进行了U20(54)和U12(34)两轮优化,并在此基础上对退火温度及循环数进行了摸索。结果表明:在一定的浓度范围之内,Mg2+、d NTPs和引物浓度对体系的影响相对较小,而Taq DNA酶浓度对于整个ISSR-PCR体系的影响较大。优化后的25μL反应体系包含2.5 mmol/L Mg^2+,2.0 mmol/L dNTPs,1.0μmol/L引物,0.25 U Taq DNA聚合酶及1.0μmol/L模板DNA。最后运用优化体系对24份不同葡萄品种的DNA进行扩增验证,结果获得的DNA条带清晰,多态性比较丰富。说明优化后的ISSR-PCR体系可用于新疆不同葡萄种间亲缘关系和遗传多样性等领域的研究。

主 题 词：葡萄 ISSR-PCR 体系优化 均匀设计 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

D　O　I：10.13271/j.mpb.019.000539

馆 藏 号：203102042...