转基因大豆中外源基因g10evo-epsps的qPCR检测方法的建立和验证
作者机构：农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室浙江省农业科学院浙江杭州310021 浙江大学浙江杭州310012
基 金：国家重大专项转基因生物新品种培育项目(2019ZX08013001-012)
出 版 物：《中国油料作物学报》 (Chinese Journal of Oil Crop Sciences)
年 卷 期：2021年第43卷第1期
页 码：110-116页
摘 要：耐除草剂基因g10evo-epsps在我国转基因农作物研发中常常被用作目标性状基因或筛选标记基因,因此可作为转基因成分检测的重要筛查基因,但目前缺少相应的检测方法。本研究旨在建立g10evo-epsps基因特异性的实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,从而为转基因大豆的监测提供一种稳定可靠的方法体系。本研究基于转基因大豆中的g10evo-epsps基因序列设计了qPCR检测引物和探针,并对检测方法的特异性、灵敏度、准确度和精确性进行了实验室内验证。结果显示,建立的g10evo-epspsqPCR检测方法能够特异性检测转基因大豆ZUTS-33中的g10evo-epsps目的基因;标准曲线分析表明,3次重复试验的扩增效率在90%以上,R2均大于0.99;方法的检测限(LOD)为不高于8拷贝,定量限(LOQ)推测为16拷贝;对含量为4.5%、2%、0.5%、0.09%和0.045%的转基因大豆ZUTS-33基因组DNA进行准确度分析,发现该方法测定的平均值和预期值之间的偏差为0.00%~11.11%,3次重复试验的RSDr为2.30%~17.10%。结果表明本研究建立的g10evo-epsps qPCR检测方法能够满足转基因大豆筛查检测的要求,为转基因大豆监管和标识提供技术支撑。
主 题 词：大豆 转基因成分检测 耐除草剂基因g10evo-epsps 实时荧光定量PCR(qPCR)
学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类]
核心收录：
D O I：10.19802/j.issn.1007-9084.2020309
馆 藏 号：203102322...
