刺五加皂苷E对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的影响及其机制

作     者：林时秀 郭冰玉 回蔷 陶凯 Lin Shixiu;Guo Bingyu;Hui Qiang;Tao Kai

作者机构：北部战区总医院烧伤整形科沈阳110016 

基　　金：国家自然科学基金(81971845) 

出 版 物：《中华烧伤杂志》 (Chinese Journal of Burns)

年 卷 期：2021年第37卷第3期

页      码：279-287页

摘      要：目的探讨刺五加皂苷E对人增生性瘢痕成纤维细胞(Fb)生长的影响及作用机制。方法采用实验研究方法。收集北部战区总医院2018年10月—2019年3月收治的6例增生性瘢痕患者[男1例、女5例,年龄20~51(37±8)岁]的增生性瘢痕组织,培养第3~7代人增生性瘢痕Fb用于后续实验。取细胞,分为生理盐水组、100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组和400μmol/L刺五加皂苷E组,分别加入生理盐水,终物质的量浓度为100、200、400μmol/L的刺五加皂苷E。取细胞,分为单纯小干扰RNA(siRNA)-阴性对照组、单纯siRNA-血小板反应蛋白1(THBS1)组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组和siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组,单纯siRNA-阴性对照组和siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组细胞转染siRNA-阴性对照,单纯siRNA-THBS1组和siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组细胞转染siRNA-THBS1,转染24 h后单纯siRNA-阴性对照组和单纯siRNA-THBS1组细胞加入生理盐水,siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组和siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组细胞加入终物质的量浓度为400μmol/L的刺五加皂苷E。于处理后0(即刻)、12、24、36、48 h,采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性(以吸光度值表示)。取细胞分为生理盐水组、200μmol/L刺五加皂苷E组、400μmol/L刺五加皂苷E组,另取细胞分为单纯siRNA-阴性对照组、单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组、siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组,相应处理同前,于处理后24 h,行Hoechst 33258染色观察细胞凋亡情况。取细胞分为生理盐水组、100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组、400μmol/L刺五加皂苷E组,另取细胞分为单纯siRNA-阴性对照组、单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组、siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组,相应处理同前,于处理后24 h,采用蛋白质印迹法检测细胞THBS1蛋白水平。以上实验每组各时间点样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、独立样本t检验、Bonferroni校正。结果处理后0 h,生理盐水组、100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组和400μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值相近(P>0.05)。处理后12、24、36、48 h,100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组、400μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值均明显低于生理盐水组(t=7.64、28.94、13.69、5.87,6.96、22.83、14.75、11.52,21.09、20.15、29.52、23.12,P0.05);处理后12、24、36、48 h,单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值明显低于单纯siRNA-阴性对照组(t=7.14、44.87、20.67、40.98,9.26、11.08、15.33、20.56,P0.05)。处理后24 h,与生理盐水组比较,200μmol/L刺五加皂苷E组和400μmol/L刺五加皂苷E组凋亡细胞数量增加。处理后24 h,与单纯siRNA-阴性对照组比较,单纯siRNA-THBS1组和siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组凋亡细胞数量增加;单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组和siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组凋亡细胞数量相近。处理后24 h,100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组、400μmol/L刺五加皂苷E组细胞THBS1蛋白水平(0.87±0.12、0.38±0.07、0.20±0.09)均明显低于生理盐水组(1.8

主 题 词：瘢痕 细胞增殖 细胞凋亡 成纤维细胞 皂苷类 

学科分类：100208[100208] 1007[医学-药学类] 1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.cn501120-20200219-00072

馆 藏 号：203102354...