lnc171靶向调控miR-149-5p促进肝癌细胞的迁移

作     者：黄诗萍 廖舟翔 杨丽超 何晓 黄雪静 Huang Shiping;Liao Zhouxiang;Yang Lichao;He Xiao;Huang Xuejing

作者机构：广西医科大学公共卫生学院南宁530021 桂林医学院公共卫生学院桂林541002 广西医科大学实验动物中心南宁530021 

基　　金：广西自然科学基金面上项目(No.2018GXNSFAA281165) 广西医科大学青年基金资助项目 

出 版 物：《广西医科大学学报》 (Journal of Guangxi Medical University)

年 卷 期：2021年第38卷第2期

页      码：287-293页

摘      要：目的:探讨长链非编码RNA RP1-171K16.5(lnc171)对肝癌细胞的作用和机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测正常人和肝癌患者血浆外泌体、正常肝细胞和肝癌细胞中lnc171的表达水平;设计siRNA转染肝细胞,分为空白对照组(Blank组)、阴性对照组(siNC组)和干扰组(si171组);采用Transwell实验检测lnc171对细胞迁移的影响;RegRNA、miRDB和LncBase在线靶基因预测网站预测lnc171的靶基因,并采用Venny 2.1对3个数据库预测结果取交集;双荧光素酶报告基因实验验证lnc171和miR-149-5p之间的靶向关系;生物信息学分析miR-149-5p的靶蛋白RAP1并用qPCR验证。结果:肝癌患者血浆外泌体中lnc171的表达水平高于正常对照者(P<0.01),肝癌细胞中lnc171的表达水平高于正常肝细胞(P<0.05);与siNC组比较,转染si171-3后,HL-7702和Hep3B细胞迁移数量明显下降(P<0.05);生物信息学预测lnc171的靶基因为miR-149-5p;与siNC组比较,Hep3B细胞转染si171-3后miR-149-5p的表达量升高(P<0.001);lnc171WT中miR-149-5p mimics组荧光素酶活性较miR-NC组下降(P<0.05);利用TargetScan和MicroT-CDS在线网站预测miR-149-5p的靶基因取得256个交集靶基因,将其放入DAVID数据库中进行KEGG通路富集得到与迁移相关的RAP1信号通路。生存分析发现,Ras-associated protein 1A(RAP1A)高表达的肝癌患者预后差。结论:lnc171在肝癌中高表达,可能通过靶向作用miR-149-5p调控RAP1A表达水平从而促进肝癌细胞迁移。

主 题 词：肝癌 lnc171 miR-149-5p RAP1A 迁移 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2021.02.012

馆 藏 号：203102364...