中国麻疹病毒疫苗株与野毒株鉴别方法的建立

作     者：周剑惠 王爽 陈超 常新 刘桂艳 桃育晖 潘希平 张燕 许松涛 许文波 

作者机构：吉林省疾病预防控制中心吉林省卫生厅病毒重点实验室长春130021 长春市疾病预防控制中心吉林长春130033 长春市二道区疾病预防控制中心吉林长春130031 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室世界卫生组织西太平洋区麻疹参比实验室北京100050 

基　　金：吉林省科学技术发展计划项目(合同编号:200705492) 吉林省卫生厅病毒重点实验室科研课题 

出 版 物：《中国疫苗和免疫》 (Chinese Journal of Vaccines and Immunization)

年 卷 期：2009年第15卷第4期

页      码：310-315页

摘      要：目的研究建立一种简便快速的鉴别中国麻疹病毒疫苗株与野病毒的方法。方法在血凝素(Hemagglutinin)蛋白基因(H基因)上,寻找能将中国麻疹病毒疫苗株区别于野毒株的限制性内切酶酶切位点,并在包含此酶切位点的基因片段上设计逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)引物,同时对所建立的RT-PCR方法进行敏感性和特异性实验证明,对RT-PCR产物利用限制性片段长度多态性分析方法(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)进行酶切鉴定。结果该一步法RT-PCR方法比较敏感,至少能够检测4.64TCID50(50%组织培养感染剂量,Median Tissue Culture Infective Dose)麻疹病毒。而非麻疹病毒RT-PCR结果均未见阳性条带,说明RT-PCR方法特异。PCR产物经Af1Ⅱ酶切作用后,中国麻疹病毒疫苗株沪191与长47PCR产物均能被切成两个片段,分别为287bp和151bp,2株麻疹野病毒代表株均不能被Af1Ⅱ酶切。结论新建立的RT-PCR-RFLP是一种快速、简便的鉴别中国麻疹病毒疫苗株与野毒株的方法。

主 题 词：麻疹病毒 疫苗株 野毒株 逆转录-聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.19914/j.cjvi.2009.04.009

馆 藏 号：203102553...