重组酶快速检测十足目虹彩病毒1方法的建立

作     者：尹伟力 吴葳 刘晓静 马晓玲 韩伟 吴宁宁 陈燕平 YIN Weili;WU Wei;LIU Xiaojing;MA Xiaoling;HAN Wei;WU Ningning;CHEN Yanping

作者机构：烟台海关技术中心山东烟台264000 武汉农业检测中心湖北武汉430016 荣成海关山东荣成264300 上海医药集团青岛国风药业股份有限公司山东青岛266000 青岛海关技术中心山东青岛266000 

基　　金：国家重点研发计划项目(2017YFF0211103) 海关总署科研项目(2019IK034) 国家质量监督检验检疫总局科研项目(2017IK232) 

出 版 物：《水产科学》 (Fisheries Science)

年 卷 期：2021年第40卷第2期

页      码：267-272页

摘      要：为建立十足目虹彩病毒1的快速检测方法,根据十足目虹彩病毒1的ATP酶基因(ORF114R)保守序列设计特异性引物,通过条件优化,建立基于重组酶聚合酶扩增技术的十足目虹彩病毒1检测方法。重组酶聚合酶扩增技术的最优扩增温度为30 ℃,恒温反应20 min内即可完成。特异性试验结果显示,该方法与其他常见虾类感染病毒无交叉反应。敏感性试验结果显示,该方法对十足目虹彩病毒1的最低检出限为7 拷贝/μL,低于传统的巢式PCR方法。利用已建立的重组酶聚合酶扩增技术方法和PCR方法对采集的509批临床样品进行检测,试验结果表明,重组酶聚合酶扩增技术能够有效检出PCR方法的弱阳性样品,表明重组酶聚合酶扩增技术可以用于临床检测。笔者建立的检测十足目虹彩病毒1的重组酶聚合酶扩增技术具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,适合基层实验室及现场检测。

主 题 词：十足目虹彩病毒1 重组酶聚合酶扩增技术 快速检测 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

D　O　I：10.16378/j.cnki.1003-1111.19235

馆 藏 号：203102578...