靶向Bi-1基因的重组慢病毒载体构建及其在NIH3T3细胞中的表达

作     者：李祥勇 罗海清 林观平 周克元 LI Xiang-yong;LUO Hai-qing;LIN Guan-pin;ZHOU Ke-yuan

作者机构：广东医学院生物化学与分子生物学研究所湛江524023 广东医学院附属医院肿瘤中心湛江524023 

基　　金：广东省重点扶持学科项目(GX9307) 广东省科技计划项目(83039) 

出 版 物：《医学研究生学报》 (Journal of Medical Postgraduates)

年 卷 期：2010年第23卷第12期

页      码：1240-1243页

摘      要：目的慢病毒载体技术已被广泛应用于基因功能分析、信号转导通路和基因治疗的研究。文中应用慢病毒系统构建凋亡抑制基因Bi-1的慢病毒表达载体并检测其在NIH3T3细胞中的表达,为后续的以Bi-1基因为靶点的肿瘤基因治疗研究奠定基础。方法根据慢病毒表达载体酶切位点的特征序列设计PCR扩增引物并扩增人Bi-1 cDNA,并采用DNA重组技术定向克隆至pLCMV-IG质粒中,构建重组慢病毒载体质粒pLCMV-IG-Bi-1,经PCR、双酶切和测序鉴定后,包装慢病毒感染至小鼠成纤维细胞株NIH3T3中,RT-PCR及Western-blot分别检测NIH3T3细胞中Bi-1基因和蛋白的表达。结果 PCR、酶切及测序结果表明重组慢病毒载体构建成功;NIH3T3细胞感染重组载体包装的慢病毒后出现明显的Bi-1基因高表达。结论成功构建靶向Bi-1基因的重组慢病毒载体,为进一步研究Bi-1基因对细胞生长转化的影响提供了实验依据。

主 题 词：Bi-1 重组慢病毒载体 NIH3T3 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-8199.2010.12.003

馆 藏 号：203102606...