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益气养血方对1L-1β诱导的骨关节炎软骨细胞模型β-catenin、WISP-1蛋白水平的影响

益气养血方对1L-1β诱导的骨关节炎软骨细胞模型β-catenin、WISP-1蛋白水平的影响

作     者:段荔 段姮妃 万春平 谢招虎 吕小满 李兆福 DUAN Li;DUAN Heng-fei;WAN Chun-ping;XIE Zhao-hu;LU Xiao-man;LI Zhao-fu

作者机构:云南中医药大学云南昆明650500 云南中医药大学第一附属医院云南昆明650021 云南中医药大学基础医学院云南昆明650500 

基  金:国家自然科学基金(81760868,81960870) 云南省高校重点实验室建设计划资助 云南省中医医院住培院内课题(2017YJ014) 

出 版 物:《时珍国医国药》 (Lishizhen Medicine and Materia Medica Research)

年 卷 期:2020年第31卷第11期

页      码:2576-2579页

摘      要:目的探讨益气养血方对体外培养的1L-1β诱导的骨关节炎模型软骨细胞β-catenin、WISP-1蛋白及MMP-1、MMP-13蛋白表达水平的影响,揭示其治疗骨关节炎部分机制。方法将20只大鼠按照3d(day)-2t(time)-1h(hour)模式完成益气养血方含药血清组及生理盐水血清组的含药血清制备,另将40只SD大鼠膝关节软骨建立离体培养的软骨细胞体系,抽签法随机分为正常组和诱导组,正常组以10%FBS/DMEM培养,诱导组以含10 ng/mL IL-1β的10%FBS/DMEM进行干预,应用HE染色及免疫荧光检测进行形态学鉴定。将IL-1β诱导的软骨细胞分成8个组:益气养血方药物血清组(20%、10%、5%)、生理盐水血清组(20%、10%、5%)、阳性对照组(DKK-1 30ng/ml)和IL-1β(10ng/ml)诱导组,并设置凋亡阳性对照组(用DNA酶处理)及细胞培养基对照组,观察不同组间大鼠软骨细胞增殖情况;应用Western blot技术检测细胞β-catenin、WISP-1、MMP-1、MMP-13蛋白的表达。结果 1L-1β能诱导软骨细胞发生凋亡,益气养血方可抑制1L-1β诱导的骨关节炎模型软骨细胞凋亡,同时能下调β-catenin、WISP-1、MMP-1、MMP-13的蛋白表达水平。结论益气养血方可能通过下调β-catenin、WISP-1调控Wnt/β-catenin信号通路,抑制下游MMP-1、MMP-13水平,可能是益气养血方减轻关节软骨破坏的机制之一。

主 题 词:骨关节炎 益气养血方 Wnt/β-catenin信号通路 

学科分类:1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1008-0805.2020.11.005

馆 藏 号:203102608...

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