蚊媒甲病毒属病毒半巢式PCR方法的建立及应用

作     者：薛志静 赵宁 王君 宋秀平 孟凤霞 梁文琴 周敬祝 王丹 张忠 刘起勇 XUE Zhi-jing;ZHAO Ning;WANG Jun;SONG Xiu-ping;MENG Feng-xia;LIANG Wen-qin;ZHOU Jing-zhu;WANG Dan;ZHANG Zhong;LIU Qi-yong

作者机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室传染病预防控制国家重点实验室北京102206 山东第一医科大学基础医学院山东泰安271000 贵州省疾病预防控制中心贵州贵阳550004 山东省新发传染病溯源与防控协同创新中心山东泰安271000 

基　　金：国家科技重大专项(2018ZX10101002-002) 

出 版 物：《中国媒介生物学及控制杂志》 (Chinese Journal of Vector Biology and Control)

年 卷 期：2021年第32卷第2期

页      码：132-138页

摘      要：目的建立基于蚊媒甲病毒属病毒通用引物的半巢式PCR(RT-hemi-nested PCR)检测方法,用于甲病毒属病毒的实验室检测。方法根据GenBank中的甲病毒属病毒全基因组序列,在其保守区设计3条甲病毒属病毒通用引物,以辛德毕斯病毒(SINV)cDNA、基孔肯雅病毒(CHIKV)cDNA为模板优化条件建立半巢式PCR方法,验证该方法的敏感性及特异性,并对野外采集的蚊虫标本进行检测。结果敏感性检测结果显示,SINV、CHIKV的检测下限值分别为3×103和3×104拷贝/μl。特异性检测结果显示,该体系仅能扩增蚊媒甲病毒属病毒目的基因而不能扩增其他病毒。用该方法对野外采集的蚊虫标本进行检测,结果显示未扩增出阳性条带。结论建立的半巢式PCR检测方法特异性强、灵敏度高,可用于甲病毒属病毒感染的流行病学调查研究。

主 题 词：蚊虫 甲病毒属病毒 半巢式聚合酶链式反应 检测 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.11853/j.issn.1003.8280.2021.02.003

馆 藏 号：203102728...