公共引物介导的多重定量PCR技术在转基因大豆检测中的应用研究

作     者：张玲 钱利祥 陶静 丁威 方坛芬 韩蓉 薛满 孙万平 ZHANG Ling;QIAN Li-Xiang;TAO Jing;DING Wei;FANG Tan-Fen;HAN Rong;XUE Man;SUN Wan-Ping

作者机构：苏州市食品检验检测中心苏州215104 苏州大学药学院苏州215000 苏州市药品检验检测研究中心苏州215104 

基　　金：苏州市科技计划项目(SS202039)、苏州市科技计划项目(SS201843) 江苏省市场监督管理局科技计划项目(KJ204134) 国家市场监督管理总局科技计划项目(2020MK041) 

出 版 物：《食品安全质量检测学报》 (Journal of Food Safety and Quality)

年 卷 期：2021年第12卷第6期

页      码：2057-2067页

摘      要：目的建立公共引物介导的多重定量PCR法检测我国农业农村部允许进口的6种转基因大豆(包括:MON87701、DP356043、CV-127、MON87769、MON87705、MON87708)的方法。方法设计并筛选出针对本研究涉及的6种转基因大豆对特异性引物,在每对特异性引物的5’端均加上一段公共引物,形成特异性嵌合引物。以某种转基因大豆DNA为模板,加入多引物体系以及荧光公共引物验证GeXP(geneexpression platform)多重检测体系的特异性,每种转基因大豆DNA模板浓度分别稀释为20、2、1、0.2、0.02ng/μL,运用GeXP多重PCR方法进行单一DNA模板灵敏度分析并优化各对特异性嵌合引物的工作浓度。结果多重PCR检测体系扩增出特异性片段,GeXP检出的各转基因大豆片段长度MON87701、DP356043、CV-127、MON87769、MON87705和MON87708分别为140.75、184.42、274.93、308.47、467.98和517.67 bp, GeXP多重检测体系检测敏感性可达到为1 ng/μL,扩增产物测序结果进一步说明了引物扩增的特异性。结论本研究建立的基于GeXP系统的多重PCR定量检测技术,可以准确鉴别6种转基因大豆,为转基因大豆及其他转基因产品提供了新型的检测方法。

主 题 词：转基因大豆 基因表达平台 多重PCR 公共引物 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

D　O　I：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2021.06.002

馆 藏 号：203102785...