双荧光素酶报告基因系统检测CYP3A4* 1G增强CYP3A4表达的调控作用

作     者：杨卫红 闫良 刘利娥 赵登职 张卫 张莉蓉 YANG Weihong;YAN Liang;LIU Lie;ZHAO Dengzhi;ZHANG Wei;ZHANG Lirong

作者机构：郑州大学基础医学院法医学系郑州450001 郑州大学基础医学院药理学系郑州450001 郑州大学公共卫生学院卫生化学与卫生检验系450001 郑州颐和医院药学部郑州450047 郑州大学第一附属医院麻醉科郑州450052 

基　　金：国家自然科学基金项目81173127 81171060 河南省杰出青年基金项目074100510020 河南省教育厅基础研究项目13A310663 河南省科技厅基础与前沿技术研究计划项目142300410206 

出 版 物：《郑州大学学报（医学版）》 (Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences))

年 卷 期：2015年第50卷第6期

页      码：765-768页

摘      要：目的:探讨CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达的负调控作用。方法:设计合成包含CYP3A4*1G G或A等位基因的一系列基因片段(外显子10与内含子10交界处287和181 bp),构建CYP3A4*1G正向位于CYP3A4启动子上游的荧光素酶报告基因载体,与内参质粒pRL-TK共转染Hep G2细胞,通过双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果:与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在287 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=795.575,P0.05)。与CYP3A4启动子相比较,G与A等位基因在181 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达(F=23.218,P0.05)。结论:在CYP3A4内含子10与外显子10交界处CYP3A4*1G存在与CYP3A4*1G变异无关的CYP3A4启动子的抑制元件,该抑制元件对CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达起负调控作用。

主 题 词：CYP3A4*1G CYP3A4启动子 双荧光素酶报告基因 转录调控 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.13705/j.issn.1671-6825.2015.06.009

馆 藏 号：203102840...