利用RNA干扰技术构建IER5-SiRNA-Hela细胞系

作     者：李莉 赵焕英 杨川杰 鲁苇媛 郝淳 乔茶 周平坤 徐勤芝 丁库克 

作者机构：首都医科大学附属北京佑安医院北京100069 首都医科大学北京100069 河北医科大学附属第二医院河北石家庄050000 军事医学科学院放射毒理研究室北京100850 

基　　金：国家自然科学基金(30770533 30270423) 北京市教育委员会科技发展基金(Km200710025007) 北京市自然科学基金(7092013) 国家高科技研究发展计划(863)资助项目(编号:2004AA221160) 

出 版 物：《中国实验诊断学》 (Chinese Journal of Laboratory Diagnosis)

年 卷 期：2011年第15卷第1期

页      码：3-6页

摘      要：目的观察小干扰RNA(siRNA)转染Hela细胞后,对IER5基因抑制效果,筛选出高效的siRNA转染质粒。方法利用siRNA设计软件,将设计好的RNA片断插入到siRNA表达质粒载体PsilencerTM 3.1-H1 hygro中,测序正确后转染至Hela细胞中。利用Real-time PCR的方法 ,测定siRNA对Hela细胞中IRE5的抑制效果。结果在mRNA水平及Western blot测试,IER5-siRNA-Hela细胞的IER5基因mRNA表达抑制效果明显。从细胞形态上讲,IER5-siRNA-Hela细胞与正常Hela细胞相比,IER5-siRNA-Hela细胞比Hela细胞体积大。结论本实验成功的获得了特异性抑制IER5基因的IER5-siRNA-Hela细胞系。

主 题 词：Real-TimePCR IER5基因 早期反应基因 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-4287.2011.01.002

馆 藏 号：203102918...