TDO2基因敲除小鼠模型的建立和初步表型研究

作     者：李素素 常艳 魏伟 LI Su-su;CHANG Yan;WEI Wei

作者机构：安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室抗炎免疫药物安徽省协同创新中心安徽合肥230032 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(No 81573443,81673444,81973332) 安徽省自然科学杰出青年基金(No 170808J10) 高校优秀青年人才支持计划重点项目(No gxyqZD2016043) 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2021年第37卷第5期

页      码：730-734页

摘      要：目的构建TDO2基因敲除的C57BL/6小鼠,初步研究其表型。方法根据CRISPR/Cas9技术原理,设计并体外转录sgRNA,用显微注射法将Cas9、sgRNA同时注射到小鼠的受精卵。经胚胎移植,获得可能出现多种基因型并存的F0代小鼠。利用PCR法进行基因型判定,获得阳性F0代小鼠。由阳性F0代小鼠与野生型小鼠回交得到F1代杂合子小鼠。阳性F1代杂合子小鼠之间配繁,得到F2代纯合子小鼠。观察和分析纯合子小鼠的生长特性,繁殖能力和子代存活率。Western blot验证TDO2基因敲除纯合子小鼠肝脏组织中TDO2的蛋白表达。结果成功繁育和鉴定出TDO2基因敲除小鼠,PCR法成功鉴别了子代鼠的基因型;Western blot结果表明,TDO2基因敲除小鼠的肝脏组织中TDO2蛋白不表达。TDO2基因敲除小鼠饮食、体质量等未发现异常改变。结论成功建立TDO2基因敲除小鼠,为研究TDO2基因的生物学功能和在疾病中的调控作用提供实验手段。

主 题 词：TDO2 基因敲除 表型 小鼠 繁育 CRISPR/Cas9 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-1978.2021.05.024

馆 藏 号：203103128...