检测艰难梭菌耐莫西沙星gyrA基因点突变的双重荧光PCR方法的建立和评价

作     者：贾筱溪 张文竹 王媛媛 李文革 卢金星 吴媛 马超锋 Jia Xiaoxi;Zhang Wenzhu;Wang Yuanyuan;Li Wenge;Lu Jinxing;Wu Yuan;Ma Chaofeng

作者机构：陕西中医药大学陕西西安710000 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 西安市疾病预防控制中心陕西西安710000 

基　　金：国家科技重大专项(No.2018ZX10733402) 

出 版 物：《疾病监测》 (Disease Surveillance)

年 卷 期：2021年第36卷第4期

页      码：324-328页

摘      要：目的建立一种检测艰难梭菌耐莫西沙星gyrA基因点突变的双重荧光PCR方法。方法设计针对艰难梭菌gyrA基因的特异性引物,并针对莫西沙星耐药株和敏感株的gyrA基因突变位点设计不同的TaqMan-MGB探针,优化可同时检测ATT、ACT突变点的双重荧光定量PCR方法,验证该方法的灵敏性、特异性和重复性,并进行应用评价。结果该方法对莫西沙星耐药株和敏感株gyrA基因突变位点的检测下限分别可达4 copies/μL和5 copies/μL,对艰难梭菌以外其他常见肠道菌群的检测均为阴性。重复性检测结果显示,批间和批内变异系数均<5%,该方法的检测结果与测序结果一致性高(k=0.98)。结论针对耐莫西沙星艰难梭菌gyrA基因点突变建立的双重荧光定量PCR方法,灵敏且具有很高的特异性和重复性,可有效鉴别艰难梭菌莫西沙星敏感株和耐药株,并可辅助识别流行株BI/NAP1/RT027的暴发。

主 题 词：艰难梭菌 耐莫西沙星 gyrA 检测方法 

学科分类：1007[医学-药学类] 1006[医学-中西医结合类] 1005[医学-中医学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3784/jbjc.202102260090

馆 藏 号：203103131...