微流控芯片恒温扩增技术快速检测米饭中的蜡样芽孢杆菌

作     者：王珍 贺磊 肖英平 卢先东 刘艳红 陆雯 王首锋 WANG Zhen;HE Lei;XIAO Yingping;LU Xiandong;LIU Yanhong;LU Wen;WANG Shoufeng

作者机构：绿城农科检测技术有限公司杭州310052 宁波爱基因科技有限公司浙江宁波315000 浙江省农业科学院杭州310021 浙江大学医学院基础医学系杭州310058 

基　　金：国家重点研发计划(2018YFC1603400) 

出 版 物：《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 (Journal of Zhejiang University:Agriculture and Life Sciences)

年 卷 期：2021年第47卷第2期

页      码：193-202页

摘      要：为建立米饭中的蜡样芽孢杆菌微流控芯片恒温扩增快速检测方法,利用蜡样芽孢杆菌公开的hblA基因序列设计引物,加入荧光染料SYTO-9,采用微流控芯片通过环介导恒温扩增进行实时荧光读数,并通过24株菌株验证其特异性;分别用阳性质粒和阳性菌株测试其灵敏度、检出限和重复性。结果表明:2株蜡样芽孢杆菌呈阳性,22株非蜡样芽孢杆菌呈阴性;微流控芯片恒温扩增技术检测蜡样芽孢杆菌菌液的灵敏度为170 CFU/mL,检测时间在35 min内;使用合成的蜡样芽孢杆菌阳性质粒样品,其灵敏度为10μL-1,检测时间在15 min内,比传统分离鉴定方法的灵敏度高10倍;人工污染米饭中蜡样芽孢杆菌的检出限为570 CFU/g,并可在45 min内完成结果判定;蜡样芽孢杆菌阳性质粒检测重复性好,其变异系数(coefficient of variation, CV)为2.02%。综上所述,微流控芯片恒温扩增快速检测方法特异性好、灵敏度高、结果准确,可用于米饭类食品中蜡样芽孢杆菌的快速检测。

主 题 词：微流控芯片 环介导恒温扩增 蜡样芽孢杆菌 米饭 检测 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3785/j.issn.1008-9209.2020.06.101

馆 藏 号：203103162...