鉴别大肠杆菌O_(8)/O_(9)血清型双重PCR方法的建立

作     者：朱红 李妍 魏娟文 张耀东 王瑶 陶程琳 AFAYIBO Dossêh Jean Apotre 李涛 祁晶晶 田明星 丁铲 于圣青 王少辉 ZHU Hong;LI Yan;WEI Juan-wen;ZHANG Yao-dong;WANG Yao;TAO Cheng-lin;AFAYIBO Dossêh Jean Apotre;LI Tao;QI Jing-jing;TIAN Ming-xing;DING Chan;YU Sheng-qing;WANG Shao-hui

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 

基　　金：国家重点研发计划项目(2016YFD0500800,2018YFE0102200) 上海浦江人才计划项目(2019PJD057) 兵团财政科技计划项目(2020AB025) 中央级公益性科研院所基本科研业务费(2020JB03) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2021年第51卷第5期

页      码：569-574页

摘      要：为了建立一种能鉴定大肠杆菌O8、O9血清型的高效、快速的双重PCR方法,参考Gen Bank中大肠杆菌O8、O9血清型的O抗原合成基因簇序列筛选特异性靶标基因并设计合成2对PCR引物,通过优化反应条件,分析双重PCR方法的特异性、敏感性,通过检测大肠杆菌临床分离株验证双重PCR的实用性。结果显示,所建立的双重PCR方法可有效鉴定O8、O9血清型大肠杆菌,对其他血清型大肠杆菌及菌株则无交叉反应,表明PCR方法的特异性好;O8和O9血清型的菌体最低检出限分别为1×10^(3)CFU/m L和1×10^(4)CFU/m L,其DNA最低检出限分别为10 pg/μL和500 pg/μL。临床分离菌株检测显示,双重PCR检测结果与传统血清凝集结果一致。结果表明,本研究建立的双重PCR方法可有效、特异、灵敏、快速鉴定大肠杆菌O8、O9血清型,为大肠杆菌O8、O9血清型检测及其流行病学调查提供了新的技术手段。

主 题 词：大肠杆菌 O8 O9 血清型 双重PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0071

馆 藏 号：203103365...