Ⅰ群禽腺病毒通用型二温式PCR和VPCR方法的建立及初步应用

作     者：赵磊 刘畅 刘欣超 王旋 黄佳佳 阮来田 张训海 ZHAO Lei;LIU Chang;LIU Xinchao;WANG Xuan;HUANG Jiajia;RUAN Laitian;ZHANG Xunhai

作者机构：安徽科技学院家禽疫病防控监测安徽省重点实验室凤阳233100 池州市贵池区动物卫生监督所池州247000 

基　　金：安徽省教育厅重点项目(KJ2019A0800,KJ2017A504) 安徽省家禽产业技术体系项目(AHCYJSTX-06) 高校重点学科(AKZDXK2015B03) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2021年第29卷第3期

页      码：47-55页

摘      要：为建立快速检测Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-I)血清型通用PCR方法,根据FAdV-Ⅰ12个血清型基因保守区设计引物,建立了二温式PCR和VPCR方法。结果显示:本研究建立的FAdV-Ⅰ二温式PCR方法,在90℃~94℃变性3 s、70℃~74℃退火兼延伸8 s,循环35~40次时,最快可在15 min内完成扩增;对分属5个种的5个血清型毒株检测都呈阳性,对EDSV、NDV、沙门菌等12种禽常见病原核酸检测呈阴性;最低检测质粒拷贝数为13.9 copies/μL,最低检测病毒滴度为100.3 EID50/0.1 mL;对源于FAdV-4感染致死SPF鸡的心脏、肝脏、脾脏等14种样品核酸提取物检测均为阳性。建立的VPCR,在92℃变性0 s、70℃退火延伸0 s,40次循环时,可23 min完成,其最低检测质粒拷贝数亦为13.9 copies/μL;对150份采集自安徽省部分地区样品及送检病料的检测与分析显示,所建立的二温式PCR和VPCR总阳性检出均率为30.7%,其符合率为100%。本研究表明,所建立的通用型二温式PCR和VPCR方法,均可用于Ⅰ群FAdV的快速检测与鉴定。

主 题 词：Ⅰ群禽腺病毒 通用型 二温式PCR VPCR 快速诊断 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2021.03.008

馆 藏 号：203103383...