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恙虫东方体环介导恒温扩增技术检测方法的建立

恙虫东方体环介导恒温扩增技术检测方法的建立

作     者:刘泽霞 胡胜锋 田国宝 景钦隆 黄曦 LIU Ze-xia;HU Sheng-feng;TIAN Guo-bao;JING Qin-long;HUANG Xi

作者机构:中山大学中山医学院免疫学教研室广东广州510080 中山大学中山医学院结核病防治研究所广东广州510080 中山大学人类病毒学研究所广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广东广州510080 广州市疾病预防控制中心广东广州510440 

基  金:国家自然自然科学基金(31470877) 国家科技重大专项基金(2013ZX10003001 2012ZX10004903) 国家自然自然科学基金委员会与财团法人台湾李国鼎科技发展基金会联合项目基金(81261160323) 广东省引进创新科研团队项目基金(2009010058) 

出 版 物:《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期:2015年第15卷第11期

页      码:1463-1466页

摘      要:目的利用环介导恒温扩增技术(LAMP)建立一种简便、快速、有效的恙虫东方体检测方法。方法利用LAMP DESIGNER软件设计恙虫东方体TSA56基因通用检测引物,建立恙虫东方体LAMP检测方法。并与Realtime PCR和普通PCR方法进行检测特异性和灵敏度的比较。同时,对16例临床确诊的恙虫东方体感染病例以及20例健康人样本进行检出率的比较。结果本研究设计的恙虫东方体检测引物与其他病原体无交叉反应,所建立的恙虫东方体LAMP方法的检测灵敏度与Real-time PCR一致,为1.0×102 copies/μl,是普通PCR方法灵敏度(1.0×103copies/μl)的10倍。16例临床确诊恙虫东方体感染病例血液样本或焦痂样本的检测,LAMP方法阳性检出数与Real-time PCR一致(16/16),检出率为100%,高于普通PCR方法(62.5%,10/16)。三种方法检测健康人样本均为阴性。结论本研究成功建立了一种简便、特异、灵敏的恙虫东方体LAMP检测方法,为临床恙虫东方体的诊断提供了新方法。

主 题 词:环介导恒温扩增技术 恙虫东方体 早期诊断 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

馆 藏 号:203103393...

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