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副猪嗜血杆菌sodA基因的表达及其理化性质

副猪嗜血杆菌sodA基因的表达及其理化性质

作     者:胡基雄 王席 李国攀 荣俊 HU Ji-xiong;WANG Xi;LI Guo-pan;RONG Jun

作者机构:长江大学生命科学学院湖北荆州434025 荆州长新生物有限公司湖北荆州434025 

基  金:高校教育综合奖补项目(2018-702090250401) 

出 版 物:《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期:2021年第60卷第10期

页      码:142-147页

摘      要:为探究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)sodA基因编码的超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的活性及理化性质,设计特异性引物从HPS中扩增得到目的基因sodA,利用原核表达系统对HPS SOD蛋白进行表达,通过硫酸铵分级沉淀、Sephacryl S-300凝胶过滤层析以及DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析等方法对表达蛋白进行了分离纯化,利用邻苯三酚自氧化法对纯化产物进行SOD酶活性检测,通过HPSEC法、火焰原子吸收分光光度法对其理化性质进行了初步探究。结果表明,表达的重组HPS SOD蛋白质为可溶性蛋白质,单亚基分子质量为26 ku,纯化后目的蛋白质纯度为95%,纯化后的重组HPS SOD蛋白质比活性为215.9 U/mg,经HPSEC法检测分析,重组HPS SOD呈多聚体,通过火焰原子吸收分光光度法检测纯化的重组HPS SOD中锰元素含量为0.71 mg/L。

主 题 词:副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis) 超氧化物歧化酶 邻苯三酚自氧化法 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2021.10.029

馆 藏 号:203103403...

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