H5亚型AIV NS1基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达

作     者：詹爱军 王新卫 王宪文 覃健萍 毕英佐 于康震 曹永长 Zhan Aijun;Wang Xinwei;Wang Xianwen;Qin Jianping;Bi Yingzuo;Yu Kangzhen;Cao Yongchang

作者机构：华南农业大学动物科学学院 河南农业大学牧医工程学院郑州450002 中国兽药监察所北京100081 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2008年第24卷第2期

页      码：191-194,198页

摘      要：应用DNAStar软件,参照Genbank中注册的AIV H5亚型毒株NS1基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H5亚型AIV的NS1基因,通过BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切位点将H5NS1基因插入转移质粒载体pFastbac HTa中,获得重组转移载体pFastbac HTa-H5NS1并将其转化DH10 Bac细胞,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到重组穿梭载体Bacmid-H5NS1,再将其转染昆虫细胞High Five,PCR鉴定证实该基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,经过SDS-PAGE和Western Blot检测,NS1基因在High Five细胞中得到了表达,H5NS1大小约为28kD,而且表达的产物具有特异免疫学反应性。

主 题 词：禽流感病毒 非结构蛋白 杆状病毒表达 克隆 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2008.02.034

馆 藏 号：203103418...