抗伏马菌素单链抗体与碱性磷酸酶的融合表达及活性鉴定

作     者：刘江丽 赵雪 尚国富 于欢 彭晓燕 王赟 周静 刘丽娜 曾柱 胡祖权 Liu Jiangli;Zhao Xue;Shang Guofu;Yu Huan;Peng Xiaoyan;Wang Yun;Zhou Jing;Liu Lina;Zeng Zhu;Hu Zuquan

作者机构：贵州医科大学贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心生物与医学工程重点实验室贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控省部共建教育部重点实验室贵阳550025 贵州医科大学生物与工程学院贵阳550025 贵州医科大学基础医学院贵阳550025 

基　　金：国家自然科学基金(21906036,31771014,11762006,31860262) 贵州省科技计划项目(黔科合基础1412,黔科合平台人才5676,黔科合人才团队4021,黔科合LH字7357) 贵州省科技支撑项目(黔科合支撑2787号) 贵州医科大学环境污染与疾病监控省部共建教育部重点实验室开放课题基金(黔教合KY字380) 2011协同创新中心(黔教合协同创新字04) 贵州省细胞与基因工程创新群体(黔教合KY字031)共同资助 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2021年第40卷第1期

页      码：252-257页

摘      要：为原核表达抗伏马菌素单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白并分析其活性,本研究根据抗伏马菌素单链抗体H2的基因序列设计引物,PCR扩增获得目的基因,经限制性核酸内切酶SfiⅠ和NotⅠ的酶切位点克隆到pDAP2/S载体中,转化大肠杆菌(Eschrichia coli)菌株XL1-Blue并鉴定阳性转化子。IPTG诱导H2-AP融合蛋白基因的表达,利用Western blot检测其表达情况,AP显色反应和ELISA鉴定其活性。结果显示成功构建了pDAP2/S-H2原核表达载体,融合蛋白在大肠杆菌中实现可溶性表达,并保留单链抗体和碱性磷酸酶的活性。因此,H2-AP融合蛋白通过原核表达后可用于发展伏马菌素的快速免疫检测方法。

主 题 词：伏马菌素 单链抗体 碱性磷酸酶 融合表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13417/j.gab.040.000252

馆 藏 号：203103441...