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沙门菌毒力基因多重PCR检测方法的建立及应用

沙门菌毒力基因多重PCR检测方法的建立及应用

作     者:杨登辉 王少辉 汪洋 赵益超 韩先干 孟庆美 刘新 丁铲 程相朝 于圣青 

作者机构:河南科技大学动物科技学院河南洛阳471003 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 

基  金:公益性行业(农业)科研专项(201403054) 国家自然科学基金项目(81201266) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2015年第45卷第4期

页      码:369-374页

摘      要:通过建立沙门菌不同毒力岛基因的多重PCR,对沙门菌毒力基因进行快速、灵敏的检测。根据GenBank中的序列设计合成16对引物,优化反应条件,建立了4组多重PCR,通过倍比稀释模板检测多重PCR的敏感性。利用建立的多重PCR对124株沙门菌进行毒力基因分布检测,验证多重PCR的实用性。电泳结果显示,多重PCR体系可有效扩增出每个目的基因。4组多重PCR体系的DNA敏感性分别为50、10、50、100pg;菌液敏感性分别为1×104、1×104、1×105、1×105 CFU。多重PCR与单基因PCR检测沙门菌毒力基因的结果一致。结果表明,本研究建立的多重PCR可有效检测沙门菌毒力岛基因,特异性强,灵敏度高,耗时短;还可用于沙门菌毒力基因的鉴定及分子流行病学调查。

主 题 词:沙门菌 毒力基因 多重PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2015.04.004

馆 藏 号:203103507...

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