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基于DNA“Y”型结构的指数型核酸恒温扩增策略检测microRNA

基于DNA“Y”型结构的指数型核酸恒温扩增策略检测microRNA

作     者:郑旭玲 殷文 陈俊 李裕 戴宗 邹小勇 ZHENG Xu-ling;YIN Wen;CHEN Jun;LI Yu;DAI Zong;ZOU Xiao-yong

作者机构:中山大学化学学院广东广州510275 中山大学生物医学工程学院广东广州510006 南方医科大学药学院广东广州510515 

基  金:国家自然科学基金资助项目(21775169 21801259 21974153) 

出 版 物:《分析测试学报》 (Journal of Instrumental Analysis)

年 卷 期:2021年第40卷第6期

页      码:920-927页

摘      要:该文基于“Y”型DNA模板和恒温指数扩增反应(EXPAR)技术的信号放大功能,建立了一种快速低序列依赖性的miRNA检测方法(Y-EXPAR)。以let-7b为检测目标,设计两条部分互补的DNA模板,与目标miRNA共同构成“Y”型结构,能够同时进行双向扩增,反应效率高,反应时间短,并降低了放大性能对模板序列的依赖。方法检出限低至0.3 amol/L(相当于10μL溶液中有1.8拷贝的let-7b),并能区分单碱基差异的let-7家族同源序列。应用于肿瘤细胞裂解液let-7b的检测,POI值与细胞数目对数值呈线性关系,说明Y-EXPAR在实际样品miRNA的检测中具有优势。得益于扩增的高特异性、抗干扰性和低序列依赖性,该方法为miRNA的快速检测提供了新思路,在miRNA相关的疾病研究和临床诊断方面具有良好应用前景。

主 题 词:miRNA 恒温指数扩增反应(EXPAR) 序列依赖性 疾病诊断 

学科分类:081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 070302[070302] 070303[070303] 0703[理学-化学类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1004-4957.2021.06.018

馆 藏 号:203103548...

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